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盘，请在步骤5之后插入托盘。有关详细信息，请参阅“抗体恢复”部分。 6.在整个表面上涂适量的一抗吸墨纸架的数量（对于MultiBlot为2.5毫升，对于迷你吸墨纸为5毫升，或10 mL用于Midi印迹）。7.在室温下孵育10分钟。解决方案将是吸收到污点固定器中，表面可能会变干。重要提示：请勿在吸尘器清洁后再使用真空吸尘器。孵育10分钟。8.向下压框架并施加真空。等待5-8秒，直到框架完全是空的。9.在连续运行真空的情况下，添加30 mL洗涤缓冲液（MultiBlot为15毫升）。重复洗涤步骤3次以上（总共4次洗涤）。当框架完全为空时，将TURN真空关闭。10.在印迹架的表面上涂适量的二抗（对于多印迹，为2.5 mL，5毫升用于迷你印迹，或10毫升用于Midi印迹）。在室温下孵育10分钟，然后金山区Merck细胞分析仪Merck仪器报价益启生物提供专业的细胞计数器。
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疫检测对照，茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液（10-0.63 ug）被转移到Immobilon8-P膜上。印迹被阻止补充有0.5％脱脂奶粉（NFDM）的Tris缓冲盐水含0.1％Tweeno 20表面活性剂（TBST），并用一级抗B-Tubulin进行探测（MAB3408）和次级HRP偶联的山羊蚂蚁（AP1 24P）在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。维护SNAP i.d.o 2.0系统清理去除协议每次使用时应清洁SNAP i.d.o 2.0系统。清理去除盐碱中的盐或污染物和管道，抽吸真空并通过系统冲洗散去的水。注：请勿对SNAP i.d.9 2.0系统进行高压灭菌。可以拆卸框架，并用中性清洁剂洗涤，然后用蒸馏水彻底冲洗。风干。要拆卸框架，请使用右侧的蓝色夹子调整框架的方益启生物是默克细胞计数器的代理商。
养室培养室的面积为20x1.2毫米，陷阱高度为0.7，09.1.1。13.23和45um。带正蛋白标记的支持帖保持统一的高度入口功能和下表列出了每个培养单位的比较小/比较大狼数量。图1.平板配置BD04A板具有4个单独分别的单元[A-DI。每个都有5个进水口（1-5升细胞入口（8升细胞（6）。大出口井（7）。流动）每个通道的孔（A-D）的阻力都匹配处理相应的培养室。板已发货用PBS（磷酸盐缓冲盐水）溶液预涂，可以在实验之前，请先将其替换为所选择的缓冲液。盘子是给的只能使用一次。 细胞诱捕机制局限性该板与乙酸和有机溶剂（例如饼酮，乙醇和甲醇的命运应进行相容性测试在使用前与其他酸或有机溶剂一起使用。印版操作如果需要温度控制，请使用CellASICONIX2集成块XT（CAx2-MXT20]。请参阅Cel上海益启细胞跨膜电阻仪订购方便。黄浦区MerckWB实验加速器Merck仪器
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中移出并在恒定的温度下孵育颤抖。如果需要过度保温，建议冷藏。虽然表面上的污点支架可能看起来部分干燥，印迹不会变干，因为溶液包含在框架中。注意：如果长时间处理多个印迹，则可以堆叠印迹固定框架减少工作空间。可选：如果要回收一抗，请先将抗体回收盘放入底座，然后再继续执行步骤4。4.延长孵育时间后，将框架放回底座上，卸下盖子，然后按照步骤8进行操作。通用议定书第12条。注意：SNAP i.d不需要延长二抗的孵育时间。 2.0系统。建议使用5倍浓度的二抗，持续10分钟。抗体回收1.执行《通用议定书》的步骤1至5，但将真空时间增加到2分钟，以确保所有的封闭溶液都已从框架的凹槽和通道中移除。2.从底座上取下印迹固定框架，并用一根刷子擦拭框架底部的所有残留液体。纸巾。3.将抗体收集盘放入底座，确保抗体上的定黄浦区MerckWB实验加速器Merck仪器
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